实时定量PCR分析

实时定量PCR分析

依然是mRNA的检测和定量最敏感的技术。它经常被用来量化小样本，例如从一个单细胞中提取的mRNA等。鸿拓生物根据您的需要提供实时定量PCR和基本的终点PCR。

技术流程
1.RNA的提取
2.DNase I 消化样品RNA 中的DNA
3.琼脂糖凝胶电泳检测RNA
4.RNA逆转录为cDNA
5.检测cDNA与引物质量，选择特异性好，扩增效率高的引物作为实时荧光使用引物。
6.利用相对定量的方法分析目的基因表达量的情况：
常用的看家基因有β-actin，GAPDH，18S rRNA
7.定量 PCR检测
8.分析扩增曲线和溶解曲线
溶解曲线全部为单峰表明为特异性扩增，荧光扩增曲线可以分成三个阶段：荧光背景信号阶段，荧光信号指数扩增阶段和平台期。