蛋白质N端测序技术介绍

蛋白质测序的发展简史
􀁺
􀁺自从1967年Edman本人推出的第一台自动测序仪来，经历了液相测序仪——固相测序仪——气相测序仪的发展历程。
􀁺液相测序：样品一直处于溶液状态，样品没有耦联到任何载体上，样品容易损失。
􀁺固相测序：将蛋白质共价耦联于聚苯乙烯膜，微孔玻珠或PVDF膜上再进行序列分析的方法。此方法可避免因冲洗而使样品损失，同时在序列降解及冲洗步骤采取较剧烈的条件。
􀁺气相测序：蛋白质通过polybrene等载体吸附在化学惰性的玻璃滤膜上，偶联碱和裂解酸以气相方式转运，反应副产物和ATZ氨基酸通过有机溶剂以气相方式萃取,蛋白质本身不会丢失.

蛋白质和 DNADNA测序比较

蛋白质 N--端测序优劣势
􀁺随着分子生物学的飞速发展，一种新的革命性的测定蛋白质顺序技术手段--DNA测序技术。它是根据已经测定部分氨基酸序列设计引物，扩增出其mRNA，从而推出蛋白的全序列技术.
􀁺从前面蛋白质测序和DNA测序比较,DNA测序比蛋白质直接测序有明显优势（蛋白测序的劣势：昂贵费时封闭不能测定）
􀁺但是通过测定基因编码导出氨基酸序列并不完全描述蛋白质的一级结构，蛋白质的直接测序仍有DNA测序具有的优势。
􀁺（1）确认某些蛋白质信号肽的起始和终点
􀁺（2）确认转译后被加工的氨基酸的位点